液相色譜柱常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案

1.液相色譜柱柱壓高    

 壓力單位換算：1bar＝0.987大氣壓＝14.503psi＝0.1MPa＝1.0197kg/cm2

 （1）新柱（未進(jìn)過(guò)樣品或只進(jìn)過(guò)柱效測(cè)試標(biāo)樣）壓力高：

 以原廠報(bào)告上*一樣的條件下測(cè)試比較，若壓力在報(bào)告壓力值上下浮動(dòng)200-300psi以內(nèi)，可視為正常范圍；若高于出廠報(bào)告壓力值1倍或以上，有以下原因引起：

 1.～99.9％原因：系統(tǒng)壓力高，包括保護(hù)柱，泵，管路和接頭等引起。

 解決方案：從系統(tǒng)上拿掉柱子，逐步檢查具體哪個(gè)部件引起的；或者換不同的儀器平衡柱子，比較壓力值，排除柱子本身的問(wèn)題。注意：必須是平衡柱子達(dá)足夠時(shí)間后的穩(wěn)定壓力值。如果您仍然不放心，可先寄回在我們公司實(shí)驗(yàn)室測(cè)試。

 2.～0.1％原因：柱子本身壓力高，寄回供應(yīng)方測(cè)試，如若核實(shí)，可提供相關(guān)更換等處理。

 （2）使用一段時(shí)間后的舊柱壓力升高：

HPLC系統(tǒng)原因仍然存在，排除系統(tǒng)原因后，幾乎100％的原因是由于實(shí)驗(yàn)過(guò)程中雜質(zhì)在柱中的累積。

 解決方案：盡量完善操作條件，做完樣品后要及時(shí)沖洗干凈，如緩沖鹽的流動(dòng)相一定要用高比例的水溶液（如90％）沖洗*后再用有機(jī)相保存。

2.液相色譜柱柱效低    

 （1）新柱（未進(jìn)過(guò)樣品或只進(jìn)過(guò)柱效測(cè)試標(biāo)樣）柱效低：

 以原廠報(bào)告的條件下測(cè)試同樣的標(biāo)樣，Supelco，Kromasil以及Agilent等柱子以甲苯作為比較，CNW柱子以萘作為比較，Waters柱子以苊作為比較，根據(jù)儀器不同，如果250*4.6mm，5um柱效在2000左右的差異可以認(rèn)為是符合出廠要求的；如果您的儀器測(cè)試結(jié)果相差太大，有以下原因：

 1.～99.9％原因：系統(tǒng)問(wèn)題，包括接了保護(hù)柱，平衡時(shí)間不夠等引起。

 解決方案：取下保護(hù)柱（測(cè)試柱效時(shí)不能加保護(hù)柱），增加平衡時(shí)間，對(duì)于新柱，50mm長(zhǎng)的柱子平衡時(shí)間在30min以上，150mm的柱子在45min以上，250mm長(zhǎng)的柱子在75min以上。如果您不放心，可先寄回在我們公司實(shí)驗(yàn)室測(cè)試。

 2.～0.1％原因：柱子本身柱效低，寄回公司檢測(cè)，如果核實(shí)，可提供相關(guān)更換處理，

 （2）使用一段時(shí)間后的舊柱柱效降低：

 排除系統(tǒng)原因，基本是測(cè)試的條件和樣品導(dǎo)致，如測(cè)試條件的pH值在柱子耐受pH值范圍以外，導(dǎo)致柱子內(nèi)填料的溶解或鍵和相流失，此外，樣品前處理不好也會(huì)使柱子很快損壞。

 3.液相色譜柱峰前延、拖尾等峰形不好    

 （1）柱效測(cè)試標(biāo)樣峰形差：基本原因都是平衡時(shí)間不夠引起，建議您平衡時(shí)間需達(dá)到*部分我們推薦的時(shí)間。此外，還有系統(tǒng)原因，可建議您換一臺(tái)再測(cè)試或寄回測(cè)試。

 （2）樣品峰形差：如果柱效測(cè)試峰形很好，但是測(cè)試樣品峰形差，排除平衡時(shí)間等問(wèn)題后，基本是由于樣品性質(zhì)所引起，如一些堿性樣品會(huì)有拖尾現(xiàn)象，但是降低流動(dòng)相pH值會(huì)有改善。

4. 液相色譜柱壽命短    

 根據(jù)不同系列的柱子或不同的測(cè)試條件，壽命長(zhǎng)短各有不同。建議您選擇性能穩(wěn)定、質(zhì)量有保證的品牌。